服务介绍 Service Introduction
腺病毒(Adenovirus)是目前最高效可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时高效地表达目的基因。具备宿主范围广,感染效率高;可以有效增殖,病毒滴度高;不整合到宿主基因组中,生物安全性高等特点。适用于动物水平的实验或者是某些极其难转染的细胞。
艾基生物采用AdMAX ™的系统构建重组腺病毒。首先通过穿梭质粒和骨架质粒原核重组的方法生产腺病毒载体,然后在293A细胞中进一步包装及扩增以获取高滴度重组腺毒。
服务优势 Service Advantages
专业的载体构建服务:多样的穿梭载体,满足不同客户需求,依托自有分子克隆平台,服务更专业。
标准的腺病毒包装流程:病毒滴度高,周期短,安全性好。
贴心的一站式服务:从载体设计,构建合成,测序鉴定等到病毒包装,浓缩和滴度测定等均由本公司专业团队完成。
提供的服务 Services
● 常规基因过表达/干扰腺病毒包装
● circRNA /LncRNA过表达和干扰腺病毒包装
● 腺病毒现货
技术流程 Technical Procedures
艾基腺病毒系统组成
1、一个表达载体,含有目的基因、目的基因的启动子以及一些把这个载体包装进病毒的元件;
2、一个辅助质粒;
3、293A 细胞株,能够在表达载体转染后包装出腺病毒。
定制病毒产品
注:
1)该周期不包含载体构建部分,实验分析后给出整体的实验方案、报价及周期;
2)若客户提供腺病毒载体,需要提供对应的质粒图谱,以便质粒质检;请严格按照我们的质粒提供需求寄送载体给我们,相关的项目材料均需经过QC检测,每一份材料则需要附加检测费用;客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始项目。
定制病毒产品
注:
1)对照病毒的交付周期为合同签订1周内发货;
2)腺病毒存储在HBSS缓冲液中,并采用干冰运输。
病毒产品质量保证
(1)滴度测定:腺病毒滴度是通过TCID50的方法进行检测。腺病毒通过梯度稀释,然后感染293A细胞,每个梯度个10孔,之后经过8-10天观察各孔CPE现象,以出现CPE孔为阳性,未出现孔为阴性进行统计,结果按Reed-Muench两氏法计算。 注:
1)相同细胞类型在不同转染条件下,相同病毒液的转染效率可以相差2-5倍。不同细胞类型之间可能差异会更大;
2)需要qpcr滴度验证结果需要提前说明,一般交付不含qpcr检测数据。
(2)无菌检测:病毒储液接种培养基已检测细菌和真菌的生长。
案列展示
Fig1.MOI为1的条件,293T细胞被感染的效果