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慢病毒(LV)

服务介绍  Service Introduction



        慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体,目前被广泛应用于基因水平的研究实验中,慢病毒可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达,同时对分裂和非分裂的哺乳动物细胞均具有高效的感染能力,是传统方法的数倍甚至数十倍。艾基拥有一系列专业技术,摸索出一套标准的SOP操作规程,从慢病毒载体构建、病毒滴度、纯度、活性及病毒包装系统等各方面为客户提供高质量的定制化慢病毒产品。

  

服务优势  Service Advantages



        齐全的病毒载体系统:多种慢病毒载体系统可选

        专业的载体构建服务:依托自有分子克隆平台,服务更专业

        新的病毒包装技术:多包装系统可选,病毒滴度高,周期短,安全性好

        贴心的一站式服务:从载体设计,构建合成,测序鉴定等到病毒包装,浓缩和滴度测定以及细胞稳转株的建立,筛选与鉴定等均由本公司专业团队完成

 

提供的服务  Service



        ● 常规基因过表达/干扰慢病毒包装

        ●   circRNA /LncRNA过表达和干扰慢病毒

        ● CRISPR/Cas9慢病毒定制

        ● 慢病毒现货

        ● 慢病毒稳定细胞株


技术流程 Technical Procedures



艾基慢病毒系统组成

       1、一个表达载体,含有目的基因、目的基因的启动子以及其它病毒包装所需的必要元件。 

        2、两套包装系统满足客户对载体的所有需求。它们是二代包装系统和三代包装系统,二代的两个辅助质粒和三代的三个辅助质粒分别表达产生病毒所需的结构蛋白和逆转录酶。

        3、293细胞株,能够在表达载体和包装质粒共转染后包装出慢病毒。

 

图片2 

 

 

定制病毒产品


 

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      注:

        1) 该周期不包含载体构建部分,实验分析后给出整体的实验方案、报价及周期

        2) 若客户提供慢病毒载体,需要提供对应的质粒图谱,以便质粒质检;请严格按照我们的质粒提供需求寄送载体给我们,相关的项目材料均需经过QC检测,每一份材料则需要附加检测费用;客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始项目


对照病毒及辅助病毒现货产品


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        注: 

         1)对照病毒的交付周期为合同签订1周内发货;

         2)慢病毒存储在HBSS缓冲液中,并采用干冰运输。



 

 病毒产品质量保证


(1)滴度测定:慢病毒滴度是通过“定量PCR(Q-PCR)”的方法进行检测。扩增转染了病毒的293T细胞基因组DNA中慢病毒载体ENV区的一个片段,扩增产物通过标准品定量测量整合的慢病毒载体的拷贝数。

1)相同细胞类型在不同转染条件下,相同病毒液的转染效率可以相差2-5倍。不同细胞类型之间可能差异会更大;

2)需要qpcr滴度验证结果需要提前说明,一般交付不含qpcr检测数据。

(2)无菌检测:病毒储液接种培养基已检测细菌和真菌的生长。


  

案例展示  Sample


 慢病毒产品转染细胞实例:

      例 1:293T 细胞 

 图片3图片4图片5

 Fig1.MOI 为 5 的条件,293T 细胞被48h的效果


   

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