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技术支持

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sanger测序样品

样品制备指南

DNA类型DNA长度(包括长度)模板浓度模板总量
质粒

 < 6 kb

~50 ng/uL
~500 ng
 6 kb~10 kb~80 ng/uL~800 ng
 10 kb~100 ng/uL~1000 ng
已纯化PCR产物<500 bp~1 ng/uL
未纯化PCR产物原液总体积不少于20uL
菌液

直接提取:2-4 mL已过夜培养的菌液

需扩大培养:>200 uL新鲜菌液

菌板
提供菌板注意菌落不能太过密集,标记需挑取的菌落

测序引物

≥5 pmol/uL(5uM)≥10 ul


备注:

提供菌液,请注明抗生素类型,常备抗生素:氨苄青霉素(Amp),卡那霉素(Kan),氯霉素(Chl)等等,若需接非常用抗生素,如博来霉素,建议提供样品时能一并提供相应抗生素。   

PCR产物,如果片段小于100bp,建议克隆后测序;注明条带大小,条带是否单一   ;

测序引物长度尽量控制在20-30bp,引物过短或过长均会影响测序质量  ;

提供的DNA样品用去离子水或者双蒸水溶解,不用TE缓冲液溶解。


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